疑難解析 | 2023年度直播答疑熱點(diǎn)匯總

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，我們通常會(huì)遇到各種各樣的問題，這些問題一般是多種因素造成的，如細(xì)胞密度、培養(yǎng)環(huán)境、操作方法等。2023年，普諾賽圍繞細(xì)胞培養(yǎng)問題，共舉辦了10場(chǎng)線上直播，吸引了萬余人觀看。直播期間，大家踴躍發(fā)言，提出了日常實(shí)驗(yàn)中遇到的問題。本期直播答疑篩選出部分問題做了詳細(xì)解答。牙源性干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清會(huì)誘導(dǎo)分化嗎？血清成份復(fù)雜，里面包含抑制分化的因子，也包含促進(jìn)分化的因子；間充質(zhì)干細(xì)胞一類成體干細(xì)胞大多可以用血清培養(yǎng)，單能干細(xì)胞，用血清不會(huì)分化；胚胎干會(huì)細(xì)胞分化。血清的刺激...

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直播答疑 | 細(xì)胞培養(yǎng)答疑專場(chǎng)

12月14日的直播中，普諾賽直播間為大家介紹了細(xì)胞黑點(diǎn)、細(xì)胞狀態(tài)變形、細(xì)胞空泡、聚團(tuán)、脫落等常見問題，直播回放請(qǐng)至B站-“普諾賽生物”進(jìn)行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細(xì)解答。如有其他問題，也歡迎大家在公眾號(hào)留言，我們將在線解答。消化時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)損傷細(xì)胞嗎？消化時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜蛋白的改變，最直觀的表現(xiàn)就是消化后第二天漂浮細(xì)胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化對(duì)細(xì)胞損傷小還是機(jī)械吹打?qū)?xì)胞損傷小？建議二次消化。細(xì)胞與細(xì)胞間的連接沒有...

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細(xì)胞學(xué)堂 | A-498細(xì)胞知識(shí)盤點(diǎn)

A-498（人腎癌細(xì)胞）細(xì)胞由Aaronson·S建立，是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細(xì)胞系。該細(xì)胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主，在腫瘤研究中具有一定的應(yīng)用價(jià)值，常作為腎細(xì)胞癌研究的模型。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了A-498細(xì)胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應(yīng)用，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞形態(tài)A498細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，呈上皮樣形態(tài)，細(xì)胞鋪開面積大，單位面積細(xì)胞總數(shù)量少，少量細(xì)胞有觸角；低密度時(shí)可觀察到單個(gè)細(xì)胞清晰的邊緣，密度大于100%時(shí)邊緣不清晰，細(xì)胞與...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞計(jì)數(shù)指南

細(xì)胞計(jì)數(shù)是實(shí)驗(yàn)室中常見的一項(xiàng)操作，用于確定樣品中細(xì)胞的數(shù)量，判斷細(xì)胞數(shù)量是否滿足實(shí)驗(yàn)需求。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了幾種常見的計(jì)數(shù)方法：人工手動(dòng)計(jì)數(shù)法、自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法，以及懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。1人工手動(dòng)計(jì)數(shù)法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細(xì)胞數(shù)量，從而進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。操作步驟1將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈，并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；2輕輕吹打細(xì)胞懸液，使細(xì)胞均勻分布；吸出10μL-20μL左右的細(xì)胞懸液滴在蓋片邊緣，使細(xì)胞懸液充滿蓋玻...

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直播答疑 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)解析

11月16日，普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)、培養(yǎng)注意事項(xiàng)，并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個(gè)細(xì)胞案例，深入講解了懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要點(diǎn)。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進(jìn)行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細(xì)解答。如有其他問題，也歡迎大家在推文底部留言，我們將在線解答。Q1傳代時(shí)，細(xì)胞密度比較低，但是培養(yǎng)基又變黃了，怎么辦？細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞量較少，但培養(yǎng)基變黃較快，可以從以下3個(gè)方面進(jìn)行排查：?檢查培養(yǎng)...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)B16系列細(xì)胞必看知識(shí)點(diǎn)

B16系列細(xì)胞屬于小鼠黑色素瘤細(xì)胞系，是源自C57小鼠的一種皮膚癌細(xì)胞，常用于腫瘤生物學(xué)研究。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了B16系列細(xì)胞的培養(yǎng)方法與注意事項(xiàng)，B16細(xì)胞黑色素的形成原因及解決方法，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。01B16系列細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)條件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)，生長(zhǎng)迅速，能產(chǎn)生黑色素；傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推薦傳代比例1:3-1:...

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培養(yǎng)基成分的稱取、分裝及保存！

培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分必須**稱取并要注意防止錯(cuò)亂，*好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基的分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)*好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分...

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細(xì)胞學(xué)堂 | 手把手教你培養(yǎng)SV-HUC-1

SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細(xì)胞)，是由猿猴空泡病毒40轉(zhuǎn)染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細(xì)胞，而建立起來的永生化細(xì)胞系。其分化特性與正常細(xì)胞相似，培養(yǎng)簡(jiǎn)單，可無限傳代，卻不屬于腫瘤細(xì)胞[1]。基礎(chǔ)信息?生長(zhǎng)培養(yǎng)基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S?生長(zhǎng)特性：貼壁，上皮細(xì)胞樣?推薦傳代比例：1:2-1:4?推薦換液頻率：2~3次/周?培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃?凍存條件：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-...

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