RAW 264.7細(xì)胞功能驗(yàn)證：吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖

RAW 264.7細(xì)胞（別名：RAW264.7、RAW-264.7等）是一種源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)腫瘤的小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞系，具有典型的巨噬細(xì)胞功能特性。該細(xì)胞系廣泛用于免疫學(xué)、炎癥反應(yīng)及腫瘤微環(huán)境研究，因其無需胰酶消化、易傳代的特點(diǎn)，成為實(shí)驗(yàn)中常用的工具細(xì)胞。

核心特性

種屬：小鼠（Mus musculus）
組織來源：Abelson病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞起源
生長特性：貼壁生長，禁用胰酶消化（胰酶會誘導(dǎo)分化）
細(xì)胞形態(tài)：不規(guī)則形，存在少量分化細(xì)胞（屬正常現(xiàn)象）
生物安全等級：BSL-2（需在二級生物安全柜操作）

培養(yǎng)方案（默認(rèn)方案A）

培養(yǎng)基配方

• 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM（[PM150210]）

• 添加物：10% FBS（[164210]） + 1% 雙抗（青霉素-鏈霉素，[PB180120]）

• 無需額外成分：已包含細(xì)胞生長所需全部營養(yǎng)，直接使用

培養(yǎng)條件

• 氣體環(huán)境：空氣（95%）+ CO?（5%）

• 溫度：37℃

• 推薦傳代比例：1:2 至 1:8（根據(jù)細(xì)胞密度調(diào)整）

• 換液頻率：每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基

關(guān)鍵注意事項

1. 胰酶禁忌：嚴(yán)禁使用胰酶消化！胰酶會刺激細(xì)胞分化，建議用細(xì)胞刮刀輕柔吹打傳代。

2. 傳代時效性：超過3天未傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞自發(fā)分化，需密切監(jiān)控密度。

3. 分化現(xiàn)象：培養(yǎng)過程中出現(xiàn)少量分化細(xì)胞屬正常，無需過度處理。

4. 凍存與復(fù)蘇： 

• 凍存液配方：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO

• 儲存條件：液氮（-196℃）長期保存，避免反復(fù)凍融。

生物學(xué)功能與應(yīng)用場景

• 吞噬與抗原呈遞：可胞飲中性紅，吞噬乳膠顆粒或酵母聚糖，具備巨噬細(xì)胞典型功能。

• 免疫調(diào)控研究：LPS或PPD刺激后可誘導(dǎo)紅細(xì)胞分解，適用于炎癥信號通路（如TLR4）研究。

• 腫瘤微環(huán)境模型：用于模擬巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用，篩選免疫調(diào)節(jié)藥物。

背景與來源

• 細(xì)胞起源：由Abelson病毒誘導(dǎo)的小鼠白血病模型建立，表面抗原sIg?、Ia?、Thy-1.2?。

• 病毒安全性：XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性，無病毒顆粒分泌。

• 保藏信息：ATCC（TIB-71）、ECACC（91062702）權(quán)-威機(jī)構(gòu)保藏。

推薦操作流程

1. 傳代步驟： 

• 吸棄舊培養(yǎng)基，PBS輕洗1-2次。

• 加入適量新鮮培養(yǎng)基，用細(xì)胞刮刀輕柔刮取貼壁細(xì)胞，吹打分散后分瓶。

2. 凍存技巧： 

• 收集對數(shù)期細(xì)胞，離心后重懸于預(yù)冷凍存液，逐步降溫（-1℃/min）后轉(zhuǎn)入液氮。

3. 復(fù)蘇要點(diǎn)： 

• 快速融化（37℃水浴），離心去除DMSO后重懸，避免過度吹打。

RAW 264.7細(xì)胞以其穩(wěn)定的巨噬細(xì)胞功能和便捷的培養(yǎng)特性，成為免疫與腫瘤研究中的理想模型。嚴(yán)格遵循無胰酶操作及傳代時效性，可最大限度維持細(xì)胞活性與功能。