拿到雞卵泡顆粒細胞應執(zhí)行以下操作

　　雞卵泡顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞，它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動，如卵泡的生長起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌，細胞呈圓形或橢圓形。細胞總數(shù)約5×105個/瓶，細胞純度高達80%以上，不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

　　從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細胞；成熟卵泡是卵巢的結構成分之一。卵泡腔大，卵丘明顯。卵泡的子宮內膜細胞靠近卵泡的顆粒層，它們之間有基底膜。子宮內膜細胞呈多角形，胞質清晰，核圓形。細胞間可見許多毛細血管。外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周圍結締組織無明顯界限。卵泡內的卵母細胞周圍有一層菱形或扁平細胞。當卵泡開始發(fā)育，卵細胞生長時，周圍的菱形細胞變成立方體，由單層長成多層。由于其細胞質中有顆粒，故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層；次級濾泡的顆粒細胞增加至多層；成熟卵泡的顆粒細胞膨脹并成為單層。顆粒細胞核大而圓，顏色深。細胞的自由表面有許多細長的突起延伸到輻射區(qū)的凹陷處。

 

　　收到雞卵泡顆粒細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。并執(zhí)行以下操作：

　　1、用1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

　　2、將細胞放入37度培養(yǎng)箱中，并在處理前預熱3-4小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

　　3、預熱*培養(yǎng)基（包括1%雙抗體）。

　　4、顯微鏡下觀察細胞生長情況，對不同倍數(shù)（40×、100×、200×各1個）的細胞進行拍照。

　　5、如果細胞密度小，無菌操作，除去培養(yǎng)基。向每瓶中加入5-6ml步驟4中制備的培養(yǎng)基。將其放入37度的培養(yǎng)箱中。當細胞密度達到80%以上時，傳代培養(yǎng)。如果細胞密度大，達到80%以上，則進行傳代培養(yǎng)。